囯产精品久久久久久久久免费蜜桃,拔萝卜未删减版hd,狼群影院www,國產麻豆av愛豆mad

免費咨詢熱線:
15522676233
技術文章
首頁 > 技術中心 > PCR實驗的七大要素

PCR實驗的七大要素

 更新時間:2024-02-22 點擊量:705
  PCR是一種能夠在短時間內將單個DNA分子擴增數百萬倍的生化過程。其擴增過程包括三個連續(xù)步驟:變性,對雙鏈DNA模板進行加熱,使其解離;退火,被稱為引物的短DNA分子與目標DNA的側翼區(qū)域結合;延伸,DNA聚合酶沿著模板鏈將引物3’端進行延伸。多年以來,PCR的基本原理一直未變,但隨著 DNA聚合酶和試劑性能的大幅提升,以及儀器和塑料反應管的不斷創(chuàng)新,PCR實驗方法也在不斷改進。那么你知道PCR實驗的七大要素嗎?讓我們一起來看看吧!
 
  一、DNA聚合酶
 
  DNA聚合酶是PCR的重要組成部分,它們能夠從單鏈DNA模板合成新的互補鏈。所有DNA聚合酶都具有5′→ 3′聚合酶活性,即摻入核苷酸并使引物從按5'至3’方向延伸。
 
  早期的PCR,通常使用來源于 大腸桿菌 的DNA聚合酶I上的 Klenow片段 來生成新的子鏈。但是,這種 大腸桿菌酶對熱敏感,易受到變性階段高溫度的破壞,從而無法繼續(xù)進行退火和延伸步驟。因此,需要在全程每個循環(huán)的退火步驟中重新補充酶。
 
  二、熱循環(huán)儀
 
  熱循環(huán)儀是一種能夠為PCR反應自動完成溫度循環(huán)和孵育的儀器。在引入熱循環(huán)儀之前,PCR反應是一個費時費力的過程,需在不同溫度的水浴之間轉移樣品,并為每個步驟需要精確定時。
 
  三、模板DNA
 
  用于復制的PCR模板可以是任何DNA來源,如基因組DNA(gDNA)、互補DNA(cDNA)和質粒DNA。
 
  四、引物
 
  PCR引物是含有15-30個堿基的合成DNA寡核苷酸。能夠與模板DNA中目標區(qū)域的側翼序列結合(通過序列互補)。在PCR反應期間,DNA聚合酶從 3′端開始延伸引物。因此,引物結合位點必須是靶標附近所有的,并且與起始DNA的其它部分序列具有最小的同源性,以確保目的片段的特異性擴增。
 
  五、脫氧核苷三磷酸(dNTP)
 
  dNTP由四個基本核苷酸組成——dATP、dCTP、dGTP和dTTP——是新DNA鏈的組成元件。這四種核苷酸通常以相等摩爾量加入到PCR反應體系中,以實現最佳的堿基引入。但是,在某些情況下,如通過PCR方法進行隨機突變,偶爾也會使用濃度不等的dNTP,以促進非校正DNA聚合酶產生更多的錯誤堿基插入。
 
  六、鎂離子(Mg2+ )
 
  鎂離子(Mg2+ )作為DNA聚合酶活性的輔助因子,有助于聚合期間dNTP的結合。酶活性位點處的鎂離子可催化引物的3′-OH與dNTP的磷酸基團間形成磷酸二酯鍵。此外, Mg2+  能夠穩(wěn)定磷酸鹽骨架上的負電荷,從而促進引物與DNA模板形成復合物
 
  七、緩沖液
 
  PCR緩沖液能夠為DNA聚合酶活性提供適宜的化學環(huán)境。緩沖液pH通常為8.0-9.5,一般使用Tris-HCl來調節(jié)。
 
  更多有關PCR實驗的七大要素,請聯系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司。
人妻丰满熟妇av无码区hd | 少妇高潮惨叫久久久久久久| 成熟人妻AV无码专区| 久久国产精品偷| 给我免费播放片在线| 人妻 校园 激情 另类| 中文字幕无码精品三级在线电影| 男男体育生控精自慰打飞| 日本在线观看| 亡は夫の上司最美人妻| 一本色道久久综合亚洲精品| 国产免费又色又爽粗视频| 99精品一区二区三区无码吞精| 中文在线中文资源| 熟女chachacha性少妇| 伊人久久大香线蕉av一区二区 | 永久免费a片在线观看全网站| 人妻影音先锋啪啪av资源| 欧洲无码一区二区三区在线观看| 人妻丰满熟妇岳AV无码区HD | 97人妻无码一区二区精品免费| 少妇愉情理伦片高潮电影| 午夜福利试看120秒体验区| 97精品国产97久久久久久免费| 一本一道久久a久久精品综合| 成人免费一区二区无码视频| 国产V综合V亚洲欧美久久| 粉嫩虎白扒开视频毛女片| 国产老肥熟xxxx| 日产精品高潮呻吟av久久 | 全黄h全肉禁乱公| 美国zoom动物| 337p大胆啪啪私拍人体| 凹凸精品视频视频学生av| 感受大海的时刻| 亚洲欧美综合在线一区| 我与岳干柴烈火| 小小水蜜桃免费影院| 亚洲av无码国产在丝袜线观看| 欧美又大又粗AAA片免费看 | 色老头av亚洲一区二区男男|