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DMEM培養(yǎng)基為什么是紅色的?

 更新時間:2023-12-06 點擊量:1871

細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基的顏色變化往往對應著細胞狀態(tài),那么你知道DMEM培養(yǎng)基為什么是紅色的嗎?讓我們一起來看看吧!

在細胞生長過程中,由于細胞釋放的代謝物改變了pH值,培養(yǎng)基的顏色也隨之改變。大多數(shù)情況下,DMEM培養(yǎng)基都呈紅色,這是因為DMEM細胞培養(yǎng)基的PH值大多在7.4左右。不同成分培養(yǎng)基的顏色會有差異,DMEM培養(yǎng)基會比1640顏色深一點,主要是DMEM里面的酚紅含量比1640多導致。在較低的pH值下,酚紅會變成中黃色,而在較高的pH值下,它會變成中紫色。對于大多數(shù)培養(yǎng)體系(pH7.2 ~ 7.4),培養(yǎng)基應為鮮紅色。

很多時候,DMEM培養(yǎng)基顏色并不是我們所見的紅色,而是偏紫或偏黃,不同顏色培養(yǎng)基究竟對應何種細胞狀態(tài)呢?

一、培養(yǎng)基顏色偏紅或者紫

開封了一段時間后的DMEM培養(yǎng)基,顏色會比正常深很多。主要是因為DMEM培養(yǎng)基所用的緩沖體系為NaHCO3,培養(yǎng)基開封后NaHCO3會分解成CO2溢出,導致培養(yǎng)基偏堿;可以將培養(yǎng)瓶擰松放置于CO2培養(yǎng)箱中一段時間后,培養(yǎng)基顏色會變正常。

二、顏色變深的DMEM培養(yǎng)基能不能繼續(xù)使用?

部分細胞能夠很快適應培養(yǎng)基的這種PH值波動,放入培養(yǎng)箱后可以正常生長;也有極少數(shù)的細胞會比較敏感,造成細胞漂浮過多等情況,如BV2細胞會就比較敏感,可能出現(xiàn)漂浮增多的情況。

三、培養(yǎng)基顏色變黃

通常DMEM培養(yǎng)基里的酚紅指示劑遇酸會變黃,但也有可能是細胞被污染而導致的DMEM培養(yǎng)基顏色變黃,以下為幾種常見情況:

1. 由于細胞代謝產(chǎn)酸,培養(yǎng)了細胞后的培養(yǎng)基會從紅變黃,如果培養(yǎng)基是橘黃色,則是細胞健康生長的顏色,無須擔心,繼續(xù)培養(yǎng)即可。

2. 若細胞狀態(tài)良好,但換液后培養(yǎng)基顏色變黃快,則可能是因為細胞密度大或消耗過大,提示需要傳代了。

3. 若細胞狀態(tài)差,生長異常,培養(yǎng)基很快變黃,變渾濁,鏡下觀察有較多小顆粒物,則有可能是細菌污染或支原體污染。輕度污染可用抗生素清洗處理或使用支原體清除試劑,重度污染建議消殺后丟棄。

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